Contenu

• Avancer d'un pas
• Partie 1 sur 2: Vérification de l'étalonnage
• Partie 2 sur 2: Calcul des résultats

Une pipette est un type d'équipement de laboratoire utilisé pour mesurer et transférer de très petites quantités de liquide. La précision et la précision de la mesure de la pipette sont nécessaires car tout écart dans les volumes délivrés peut affecter les résultats d'une expérience. Pour garantir l'exactitude, il est nécessaire de vérifier l'étalonnage de la pipette tous les quelques mois. Le processus d'étalonnage permet de vérifier que l'équipement distribue les volumes corrects afin qu'il puisse être restauré si ce n'est pas le cas.

Avancer d'un pas

Partie 1 sur 2: Vérification de l'étalonnage

1. Rassemblez le matériel nécessaire. Pour vérifier l'étalonnage d'une pipette, vous avez besoin d'une pipette, de pointes de pipette, d'eau distillée, d'un bécher, d'un thermomètre, d'une balance et de plats. La balance doit être spécifique au microgramme pour étalonner les micropipettes avec un maximum de 1 µl.
   • Vous n'avez pas besoin de plus de 5 ml d'eau. Remplissez la tasse avec de l'eau.
   • Assurez-vous que les pointes de pipette sont bien ajustées.
2. Mesurez la température de l'eau distillée. Placez le thermomètre dans l'eau et laissez-le reposer pendant au moins une minute. Si la ligne rouge sur le thermomètre est toujours en mouvement, laissez-la pendant une minute supplémentaire. Après une minute, notez la température dans un cahier. Retirez le thermomètre et séchez-le lorsque vous avez terminé.
   • La température de l'eau est importante pour les calculs effectués pour vérifier l'étalonnage.
3. Placez la balance sur la balance et réglez-la sur zéro. Idéalement, vous utilisez une balance avec des portes et une pièce isolée. Placez le bol dans la pièce et fermez les portes. S'il n'y a pas de portes, placez simplement le bol sur la balance. Appuyez sur le bouton "Zéro" ou "Tare" et attendez que la balance lise zéro.
   • En mettant la balance à zéro, le poids du bol en plastique n'est pas pris en compte et il devient possible de ne mesurer que le poids de ce que vous mettez dans le bol.
4. Préparez la pipette pour l'étalonnage. Avant de commencer, essuyez la pipette avec de l'éthanol pour éliminer tout contaminant - en outre, assurez-vous que la pointe de la pipette ne se bouche pas. Placez la bonne pointe à l'extrémité et réglez le volume que vous souhaitez tester.
   • Avant l'étalonnage, vous testez à la fois le plus petit volume et le plus grand volume que la pipette peut distribuer.
5. Rincez la pointe avant de calibrer. Appuyez sur le bouton jusqu'au premier arrêt et insérez l'embout dans l'eau distillée de manière à ce qu'environ 2 mm de celui-ci soient immergés dans le liquide. Relâchez le bouton pour aspirer du liquide, puis distribuez à nouveau le liquide en poussant le bouton vers le bas. Répétez cette opération trois fois pour rincer la pointe.
   • Appuyez sur le bouton jusqu'à la deuxième butée pour distribuer tout liquide restant dans la pointe et retirez la pipette de l'eau.
6. Aspirez le volume d'étalonnage. Avec la pointe hors du liquide, appuyez sur le bouton jusqu'au premier arrêt. Placer à environ 2 mm de la pointe dans l'eau distillée et relâcher le bouton pour aspirer le liquide dans la pointe. Attendez environ une seconde avant de retirer la pointe de l'eau.
   • Assurez-vous que la pointe est complètement immergée pendant tout le processus d'aspiration. Vous ne voulez pas de bulles dans la pointe ou le résultat ne sera pas correct.
7. Dosez le liquide dans le bol sur la balance. Placez la pointe contre le fond du bol et appuyez sur le bouton jusqu'à la première butée. Déplacez-vous vers un autre endroit, légèrement éloigné de l'eau, et appuyez sur le bouton jusqu'au deuxième arrêt. Maintenez le bouton enfoncé et soulevez la pointe du bol.
   • Gardez l'embout sur la pipette, car vous l'utiliserez à nouveau pour effectuer d'autres tests d'étalonnage. Assurez-vous que la pointe ne touche à rien.
8. Enregistrez le poids qui indique la balance. Fermez la porte si vous utilisez une balance dans une pièce isolée. Attendez que les valeurs cessent de changer. Enregistrez cette valeur dans votre cahier.
   • Il est important d'attendre que le nombre se stabilise avant de l'écrire. Vos lectures seront fausses si vous n'attendez pas.
9. Répétez ce processus jusqu'à ce que vous ayez pris au moins 10 mesures. Mettre la balance à zéro, rincer la pointe, prélever le même volume, distribuer le volume puis enregistrer le poids. Vous avez besoin de plusieurs enregistrements du même volume, puis vous pouvez prendre la moyenne de tous les enregistrements ensemble.
   • Vous pouvez répéter ce même processus avec différents volumes, à condition de prendre plusieurs mesures par volume.

Partie 2 sur 2: Calcul des résultats

1. Utilisez la formule du volume calculé. La formule de calcul du volume délivré par la pipette est V = w * Z, où w est le poids de l'eau, Z est le facteur de conversion basé sur la densité de l'eau et V est le volume calculé de la quantité d'eau il est remis.
   • Vous pouvez trouver la variable Z en recherchant la densité de l'eau à l'aide de la température enregistrée au début de l'expérience.
   • Par exemple: si la température de l'eau était de 23 ° C, vous supposez une valeur Z de 1,0035 µg / mg.
2. Calculez la moyenne des essais répétés. Vous devez avoir pesé au moins 10 fois le volume d'eau distribué par la pipette. Pour calculer la moyenne de toutes ces valeurs, additionnez-les et divisez-les par 10. Si vous avez fait plus ou moins d'essais, additionnez chaque essai et divisez la somme par le nombre total d'essais.
   • Par exemple: Les dix poids que vous avez enregistrés pour un volume de pipette de 10 µl sont les suivants: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 et 9,98.
   • La moyenne est: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Appliquez les variables à l'équation et résolvez-la. Une fois que vous avez déterminé les valeurs correctes pour chaque variable, vous pouvez les incorporer dans l'équation et résoudre le volume calculé. Pour résoudre ce problème, multipliez simplement le poids moyen de toutes les valeurs de test par la valeur Z.
   • Par exemple: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10,019
4. Calculez la précision de la pipette. Pour calculer la précision, vous pouvez utiliser l'équation A = 100 x V._moy/ V₀ où A est la précision de la pipette, V._moy le volume moyen calculé, et V.₀ la valeur que vous avez définie pour la pipette. La précision doit être comprise entre 99 et 101%.
   • Si la pipette est correctement étalonnée, la valeur calculée doit être très proche de la valeur réelle que vous avez définie sur la pipette.
   • Par exemple: A = 100 x V_moy/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Cette pipette est correctement calibrée.
5. Envoyez la pipette pour l'étalonnage, si nécessaire. Si votre pipette échoue au test d'étalonnage, arrêtez immédiatement de l'utiliser pour des expériences. Les pipettes sont des pièces très délicates et coûteuses de l'équipement de laboratoire. Vous ne pouvez pas réparer l'étalonnage vous-même, vous devrez donc l'envoyer pour un entretien approprié. Alternativement, certaines entreprises viendront dans votre laboratoire et y étalonneront vos pipettes.
   • Pour la maintenance, contactez l'entreprise qui fabrique votre marque de pipette spécifique.